三维细胞培养实验库如何建立？

我们小小的啊

　　进行三维细胞培养时，首先会进行三维细胞培养实验库的建立，但是建立三维细胞培养实验库并不是一个简单的过程，也不是简单的一句话，它需要准备各种各样的事项，那么如何才能够建立起三维细胞培养库呢？


　　如何正确地建立三维细胞培养实验室细胞库？
　　三维细胞培养研究人员在进行细胞实验时，哪些原因会导致科研数据的波动与差错？
　　1.细胞微生物污染（如：支原体，细菌，真菌，病毒等）
　　2.细胞交叉污染
　　3.细胞基因突变
　　4.细胞衰老
　　5.人为操作失误
　　平时，研究人员细胞的来源有三种，一种是直接从商业化公司（如ATCC、DSMZ、中科院细胞所）购买，另一种为自己从原代组织分离，还有一种是从其他实验室或科研人员处获取。
　　既然如此方便，我们为什么要自己建立细胞库呢？有何意义？
　　三维细胞培养细胞库可以有效保持贮存细胞的生物学效用和功能，为科研实验提供检定合格、质量稳定、可持续获得的细胞。
　　1.节省实验室空间、时间、经费
　　2.若实验失败，还有重来的机会
　　3.确保实验重复的一致性
　　4.确保未来实验的连贯性
　　因此实验室有必要建立一个安全、规范、稳定、可追溯的细胞库，我们需要从源头保证整个研究实验的规范性。
　　目前，世界上较权威的细胞库机构或者研究院都采用三级细胞库管理模式，即：原始细胞库（PCB，PrimaryCellBank），主细胞库（MCB，MasterCellBank），工作细胞库（WCB，WorkingCellBank）。
　　1.原始细胞库（PCB，PrimaryCellBank）
　　原始细胞库（PCB，PrimaryCellBank），又名细胞种子（CellSeed）或初级细胞库（Pre-masterCellBank），由一个原始细胞群体发展成为传代稳定的细胞群体，或者经过克隆培养形成的均一细胞群体，经检定证明合格。将一定数量、成分均一的细胞悬液定量装于细胞冻存管，与液氮或-130℃以下冻存，即为原始细胞库，供建立主细胞库使用。
　　2.主细胞库（MCB，MasterCellBank）
　　主细胞库（MCB，MasterCellBank）指的是，原始细胞库细胞传代增殖后均匀混合成一批，定量分装，保存于液氮或-130℃以下。这些细胞经检定合格后，即为主细胞库，供建立工作细胞库使用。
　　3.工作细胞库（WCB，WorkingCellBank）
　　工作细胞库（WCB，WorkingCellBank）是经过主细胞库传代增殖，达到一定代次水平的细胞，混合后制成一批均质细胞悬液，定量分装于一定数量的细胞冻存管，保存于液氮或-130℃以下备用。这些细胞经检定证明合格后，即为工作细胞库。
　　不同的细胞系传代能力不同，因此，研究人员须根据自己的细胞系确定工作细胞的传代次数。
　　细胞库的检定
　　上面我们介绍过在进行各级细胞库的建立时，都要进行检定，合格后才可成为相应细胞库。细胞检定主要包括以下几个方面：细胞鉴别，细菌、真菌检查，支原体检查，细胞内外源病毒因子检查，致瘤性检查，必要时还须进行细胞染色体、细胞生长特性、细胞均一度及稳定性检查。
　　三维细胞培养库是需要专业的人来操作的，因为稍不注意都会导致整个细胞库的失败。多年来康宁一直都在研究三维细胞培养的相关问题，其中也包括了细胞库的建立，取得相当好的成效，可以去了解一下。